مقاله بررسی اثر سندروم کلستاز برتغییرات بافتی هستههای مجاور بطنی
مقاله بررسی اثر سندروم کلستاز برتغییرات بافتی هستههای مجاور بطنی و فوق بصری هیپوتالاموس مغز موشهای صحرایی نر نژاد ویستار در pdf دارای 9 صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است
فایل ورد مقاله بررسی اثر سندروم کلستاز برتغییرات بافتی هستههای مجاور بطنی و فوق بصری هیپوتالاموس مغز موشهای صحرایی نر نژاد ویستار در pdf کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه و مراکز دولتی می باشد.
این پروژه توسط مرکز مرکز پروژه های دانشجویی آماده و تنظیم شده است
توجه : در صورت مشاهده بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی مقاله بررسی اثر سندروم کلستاز برتغییرات بافتی هستههای مجاور بطنی و فوق بصری هیپوتالاموس مغز موشهای صحرایی نر نژاد ویستار در pdf ،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد
بخشی از متن مقاله بررسی اثر سندروم کلستاز برتغییرات بافتی هستههای مجاور بطنی و فوق بصری هیپوتالاموس مغز موشهای صحرایی نر نژاد ویستار در pdf :
مقدمه
کلستاز ازنظر فیزیولوژیک، به توقف یا کاهش جریان صفرا در کانالیکولهای صفراوی گفته میشود .(Reyes et al., 1993) کلستاز براساس منشأ شامل دو نوع داخلکبدی و خارجکبدی است. کلستاز داخلکبدی بر اثر اختلال در عملکرد هپاتوسیتها وکلستاز خارج کبدی به دلیل عواملی نظیر سنگهای صفراوی، تومورهای پانکراس و کیسهصفرا ایجاد میشود (Moezi et .al., 2004) اثرات اولیه کلستاز شامل افزایش غلظت صفرا در سرم (که در غلظتهای بالا سمی است) و کاهش ترشح صفرا به داخل روده است (Bouscarel et al., 1998) که به وخیم-ترشدن بیماری کبدی و ایجاد بیماری سیستمیک منجر میشود .(Kountouras et al., 1984) درنهایت با پیشرفت بیماری فیبروز و سیروزکبدی اتفاق میافتد .(Moezi et al., 2004) کلستاز موجب افزایش تولید پروستاگلاندینها، کلسترول، بیلی-روبین، آلکالین فسفاتاز و افزایش سطح نمکهای صفراوی در خون میشود. کلستاز همچنین باعث اندوتوکسمی، افزایش تولید نیتریک اکساید (Moezi et al., 2004)، ایجاد تغییرات عروقی، افزایش سطح اپیوئیدهای درون زاد (Moezi et al., 2004; Borhani et al., 2005) و کاهش حافظه نیز می-
شود (Hajrasouliha et al., 2004; Hasanein et al.,
.2007; Zarrindast et al., 2012) کلستاز در هنگام بارداری
و نوزادی مشاهده گردیده است (Molina et al., 1998;
.Jones et al., 1999; Matthai et al., 2001) کلستاز بارداری بر اثر نقص ژنتیکی ایجاد و موجب نقص مادرزادی می-شود و کلستاز نوزادی بر اثر آترزی مجرای صفراوی و هپاتیت آیدیوپاتیک به وجود میآید. تظاهرات کلاسیک کلستاز شامل زردی و خارش است. علاوه بر آن، تظاهرات بالینی دیگری مانند خستگی، اختلالات استخوانی (May et al., 1995)، برادی-کاردی، تغییر در عملکرد تنفسی و ریهها و نارسایی کلیه نیز مشاهده میشود (Heidenreich et al., 1987; Gaskari et
.al., 2002; Farajzadeh Deroee et al., 2010)
هیپوتالاموس منطقه کوچکی از مغز است که در عقب و پایین مغز جلویی و در جلو و بالای مغز میانی قرار دارد. هیپوتالاموس
78/78 Nova Biologica Reperta 1 (2): 77-85 ( 2015)
بهواسطه حفره بطن سوم به طور قرینه به دو نیمه راست و چپ تقسیم میشود و کف و دیوارههای بطن سوم را تشکیل می-دهد. در هیپوتالاموس هستههایی وجود دارند که از اجتماع پریکاریون نورونها به وجود آمدهاند. کلیه اعمال و فعالیتهای هیپوتالاموس وابسته به یکی از این هستهها یا تعدادی ازآنهاست. این هستهها ازطریق اعصاب و عروق با غده هیپوفیز ارتباط دارند. دو هسته مجاور بطنی (PVN) و فوق بصری (SON) در اخذ آب نقش دارند و با آزادسازی هورمون وازوپرسین میزان جذب آب بدن را افزایش و احساس تشنگی را از بین میبرند. این هسته های هیپوتالاموسی از سلولهای درشت (ماگنوسلولار) و سلولهای کوچک (پاروی سلولار) تشکیل
شدهاند .(Oryan & Valizadegan, 2009)
نوشیدن آب پاسخی به کاهش حجم خون است که بهوسیله دو سازوکار متفاوت آغاز میشود؛ یک نوع آن زمانی است که مکانورسپتورهایی پیام تحریکی خود را برای نوشیدن ازطریق هسته منزوی (solitary tract) به مراکز هیپوتالاموسی ارسال میکنند. مرکز تنظیمی مهم دیگری که در اخذ آب نقش دارد، سیستم رنین-آنژیوتنسین است که کلیهها با کاهش فشار خون رنین را به جریان خون آزاد میکنند. رنین مسیری را فعال می-کند که رفتار نوشیدن آب را با تحریک سلولهای ماگنوسلولار SON و PVN موجب میشود و در این مورد آنژیوتنسین II همانند نوروترنسمیتر عمل میکند (Otsubo et .al., 2010) همچنین نشان داده شده است که تحریک PVN اخذ آب را افزایش میدهد .(Takahashi et al., 2001) با توجه به اینکه مرکز تنظیم تشنگی و نوشیدن در هستههای مجاور بطنی و فوقبصری قرار دارد و اخذ آب در هنگام کلستاز کاهش مییابد (Mani et al., 2001)، هدف مطالعه حاضر بررسی تأثیر کلستاز بر تغییرات بافتی هستههای مجاور بطنی و فوق بصری هیپوتالاموس است.
مواد و روشها حیوانات و شرایط آزمایش
این مطالعه در آزمایشگاه فیزیولوژی جانوری دانشکده علوم زیستی دانشگاه خوارزمی تهران انجام شد. به این منظور 21 سر
یافتههای نوین در علوم زیستی جلد 1، شماره 77-85 :2
موش صحرایی آزمایشگاهی نر نژاد ویستار با وزنی حدود -250 200 گرم و سن متوسط هشتهفته، در مرکز تکثیر حیوانات دانشگاه خوارزمی، در وضعیت کنترلشده با دمای 20 -25 درجه سانتیگراد و سیکل 12 ساعت روشنایی و12 ساعت تاریکی قرار گرفتند. کلیه موشها دسترسی آزادانه به آب آشامیدنی و غذای مخصوص حیوانات آزمایشگاهی داشتند و در وضعیت یکسان نگهداری شدند.
جراحی کلستاز
موشها به سه گروه هفتتایی کنترل، شم (جراحی ساختگی بدون بستن مجرا) و کلستاز (بستن مجرای صفراوی) تقسیم شدند. برای جراحی شم و کلستاز، ابتدا موشها با استفاده از کتامین هیدروکلراید 10درصد و زایلازین 2درصد بیهوش شدند. سپس بهوسیله الکل سطح شکمی درست در زیر جناغ تا 3 سانتیمتر پایینتر از استخوان جناغ ضدعفونی شد و موهای این ناحیه با تیغ تراشیده و پوست و عضله در دو مرحله جدا برش زده شد. سپس با کمک پنس سر کج مجرای صفراوی مشترک از زیر کبد خارج شد و بعد از جداسازی رگ خونی، دو طرف مجرا با نخ سیلک بسته و درنهایت بین دو گره بهوسیله قیچی بریده و مجرا قطع شد. در گروه شم تمام مراحل پیشگفته برای عمل کلستاز صورت گرفت، ولی مجرا بسته نشد. دو روز بعد از مسدودکردن مجرای صفراوی در حیوانات نشانههای کلستاز (زردی، ادرار تیره و اسهال چرب) مشاهده شد که به عنوان شاخص ایجاد کلستاز در نظر گرفته شد.
روش بررسی بافتی
دو و چهارهفته پساز کلستاز، برای خارجکردن مغز، ابتدا سر حیوان بیهوش از ناحیه گردن جدا و پساز قیچیکردن پوست و عضلات، سطح جمجمه باز شد و این عمل بدون آسیب به مغز و درنهایت دقت انجام گرفت. مغزهای جداشده پساز شستوشو در سرم فیزیولوژی در محلول فیکساتیوفرمالین -10 درصد قرار گرفت تا به طور کامل تثبیت شوند. مراحل آماده-سازی شامل آبگیری با درجات صعودی الکلاتیلیک و شفافسازی بهوسیله تولوئن بود. بافت پس ازشفافسازی به حمام پارافین منتقل شد و پساز قالبگیری با پارافین
79/79 Nova Biologica Reperta 1 (2): 77-85 ( 2015)
(Merck) از آن برشهای 6 میکرونی گرفته شد. رنگآمیزی با هماتوکسیلین-ائوزین (H&E) انجام شد و روی لامها، لامل چسبانده شد. برشهای مقاطع بافتی مغز در ناحیه هیپوتالاموس توسط میکروسکوپ نوری (Zeiss) تحت بررسی قرارگرفت و با استفاده از میکروگرافهای تهیهشده از این لامها، اختلافات بافتی گروههای تجربی در مقایسه با گروه شاهد بررسی شد. به منظور شمارش سلولی از نرمافزار ImageJ استفاده شد .(Lavazza et al., 2010) ضخامت هستههای SON و PVN، با قراردادن گراتیکول در اوکولر میکروسکوپ نوری از ابتدا تا انتهای هستهها برحسب میکرومتر اندازهگیری شد.
روش و ابزار گردآوری اطلاعات
محاسبهها با استفاده از تحلیل واریانس یکطرفه برای مقایسه گروهها توسط نرمافزار SPSS انجام شد. بعد از هر F معنیدار، تحلیل به کمک Post hoc tukey, test ادامه یافت. ازلحاظ آماری p کمتر از 0/05 معنی دار فرض شد.
نتایج
الف – یافتههای کیفی: مشاهدات میکروسکوپی نشاندهنده تغییرات بافتی در هستههای فوقبصری (SON) و مجاور-بطنی((PVN هیپوتالاموس در حیوانات کلستاز شده است. در موشهای کلستاتیک تراکم نورونهای تشکیلدهنده هستههای SON و PVN کاهش یافته و مورفولوژی سلولهای تشکیل-دهنده تغییر کرده است و سلولها کوچک و چروکیده شدهاند. همچنین هتروکروماتینهشدن سلولها و ائوزینوفیلهشدن بافت هستهها مشاهدهشد. در شکل 1 مقایسه اسلایدها نشان میدهد که هیچ تغییری در بافت هسته SON در گروههای کنترل و شم 1A)، B، و (C قابل مشاهده نیست. درصورتیکه با بررسی این دو گروه با 1D (گروه کلستاتیک)، فاصلهگرفتن سلولها در اثر نکروز قابل رؤیت است. همچنین در شکل 2 عکس های A، B، و C که گروههای کنترل و شم هسته PVN را نشان میدهند، تغییری در ساختار این هسته ایجاد نشده است، درصورتیکه در 2D، که نمونه کلستاتیک است، هتروکروماتینهشدن هستهها و ایجاد فضای خالی اطراف سلولها نشان مرگ سلولی است که در حالت کلستاتیک به میزان زیادی در بافت هسته PVN
یافتههای نوین در علوم زیستی جلد 1، شماره 77-85 :2
مشاهده میشود. انسجام بافتی دو گروه قبل نیز در این گروه مشاهده نشد. با مقایسه شکل 3 کلستاز دوهفتهای و چهارهفتهای افزایش تغییرات بافتی بهخصوص در هسته PVN دیده میشود.
80 Nova Biologica Reperta 1 (2): 77-85 (2015) 80/
شکل– 1 هستههای فوقبصری در هیپوتالاموس گروه کنترل، اسلاید A (بزرگنمایی (×10، اسلاید B (بزرگنمایی (×100، گروه شم اسلاید C (بزرگنمایی (×100، گروه کلستاز اسلاید D (بزرگنمایی .(×100 با مقایسه تصاویر گروه کنترل و گروه شم تغییر خاصی قابل مشاهده نیست، ولی گروه کلستاز با کاهش تراکم بافتی، نکروز و هتروکروماتینهشدن هسته فوقبصری همراه است. هسته فوق بصری: SON، اپتیک کیاسما: OC، بطن سوم : Vlll (رنگ آمیزی .(H&E
Fig. 1. Supra optic nucleus of hypothalamus, A: Control (10X), B: Sham (100X), C: Cholestasis (100X). Brain tissue necrosis and wrinkle chromatic nuclei in supra optic nucleus in cholestatic rats were increased, but in the sham and
control rats no changes were observed (H&E).
شکل -2 هستههای مجاوربطنی در هیپوتالاموس گروه کنترل، اسلاید A (بزرگنمایی (×40 و اسلاید B (بزرگنمایی (×100، اسلاید C گروه شم (بزرگنمایی (×100، اسلاید D گروه کلستاز (بزرگنمایی .(×100 با مقایسه بافت گروه کنترل و گروه شم تغییر خاصی قابل مشاهده نیست ولی گروه کلستاز با کاهش تراکم بافتی، نکروز و هتروکروماتینهشدن هسته مجاور بطنی همراه است. هسته مجاوربطنی PVN: ، بطن سوم : .Vlll (رنگ آمیزی H&E، بزرگنمایی ×100 و . (× 400
Fig. 2. Para ventricular nucleus of hypothalamus, A: Control (40X), B: Sham (100X), C: Cholestasis (100X). Brain tissue necrosis and wrinkle chromatic nuclei in Para ventricular nucleus in cholestatic rats were increased, but in the
sham and control rats no changes were observed (H&E).
اشتراک‌گذاری:
کلمات کلیدی :
» نظر